基于转录组学和蛋白质组学的高海拔肺动脉压缩机大鼠模型的新靶点

肺动脉高压（PH）是仅指血清素时少于肺动脉压≥25 mmHg。 它根据心悸动力研习特点、发病系统和临床研习细分五类。 第三类高山区肺动脉高压（HAPH）是由于在高山区间歇性周边环境中肺导流存量代偿性增加和肺小动脉血管收缩招致的，所致高原心肌病。 诊疗症状仅限于运动性呼吸困难、头晕和劳累。 HAPH 可能解读了未能适应高山区，并伴有不确切的临床生理系统。 至少有 1.4 亿人生活在山区 2,500 米以上的地区，每年有超过 4,000 万人出访这些高山区地区。 间歇性所致人体器官DNA理解谱发生区别变化； 这就是指长期住在在高山区地区的居民及其后代的DNA型持续性变化中得知的。HAPH 的疗程仍在研习术研究中。应劝告患者移至低山区地区，钾疗有效。本品疗程的研习术研究仅限于一些随机检验。 HAPH 的临床与其他类型的 PH 相互似，因此值得考虑对 PAH 有效的本品是否是对 HAPH 有效。

然而，所有这些类似物本品都在HAPH中的必要性和系统尚不确切。为了解决这个问题，我们旨在研习术研究间歇性所涉及的小分子系统，常用灵长类动物 HAPH 建模，并分析方法综合多分组研习方法。 在此每一次中，我们旨在研习术研究几种类似物本品和复钾的作用，以断定高山区招致的间歇性的潜在新疗程靶标。 特别是，我们研习术研究了类似物本品如何制约人体器官之间的区别DNA和核糖体理解。

研习术研究设计：

将灵长类动物放在 10% O2（间歇性）室中 3 周以造成 PH。比对灵长类动物（C 分组）在整个实验中都处于常钾周边环境下，并在疗程期间（即从第 21 天开始）用媒介展开疗程。 3时为，其余灵长类动物随机细分六分组；一个大被处刑（第 21 天）以评估急救功能性。其余 5 分组用类似物本品或复钾疗程，从第 21 天到第 35 天处刑。慢性间歇性，媒介解决问题（M）；慢性间歇性，司来帕格疗程；慢性间歇性，马西替坦疗程；慢性间歇性，riociguat 疗程；慢性间歇性、复钾 (RE)。

激活分组深入研习术研究：

浓缩总 RNA，并通过常用 Arraystar rRNA Removal Kit 去除 rRNA 来掺入 mRNA 和非序列 RNA。 mRNA 和非序列 RNA 被片段化葡萄糖分解成首集段（~200-500 nt）。以首集段为模板，利用随机六聚体PCR多肽第一末端cDNA。在第二末端多肽每一次中，dTTP 被 dUTP 改用。 然后加入下手葡萄糖以通过末端复原和掺入腺嘌呤来氢化和裂解首集段。 首集段被氢化并与接头连接； 常用脯氨酸-N-脂质激酶咀嚼第二条末端。 琼脂糖电子衍射后，可选择适宜的片段作为模板展开PCR逐次。 常用 Agilent 2100 生物深入研习术研究仪和 ABI StepOnePlus 实时 PCR 系统对混合物托展开定存量和质存量评估。 该文托常用 Illumina HiSeq 2000 系统展开测序。

LC-MS/MS 深入研习术研究

在连接到 Easy-nLC 1000 液相互色谱系统的Q Exactive HF 质谱仪上深入研习术研究混合物。将湿气的肽混合物重新溶解在溶剂 A（0.1% 丙酮氢氧化钠）中并加载到捕集柱中常用溶剂 A 的最大担忧为 280 bar，然后在自造的 150 μm × 30 cm 填充物微柱上以 5–35% 的梯度展开裂解流动相互 B（乙腈和 0.1% 丙酮），流速为 600 nl/min，长时间 150 分钟。 QE HF 的 MS 深入研习术研究是在 3e6 离子的自动增益控制目标下展开一次全扫描，然后展开多达 30 次与数据相互关的 MS/MS 扫描带有较低能存量的挤压解离，在 Orbitrap 中样品到（R = 15,000 在 200 m/z）。

研习术研究结果：

基于RNA-seq数据的共理解互联的功能性掺入深入研习术研究和主干线小分子检验。

基于核糖体数据的共理解互联的功能性掺入深入研习术研究和主干线小分子检验。

RNA-seq 和核糖体分组研习洞察了对三种本品的重排之间的极强相互关性，带有几乎相互同的视觉效果。GO 掺入显示区别理解的DNA仅限于直接参与代谢恒定、激活和英文翻译的DNA。

司来帕格、马西替坦和复钾可缓解 HAPH。Serpina1、Cryz 和 Cmc1 被检验出来，通过多分组研习比对，作为直接参与HAPH的关键DNA。这些发现为 HAPH 的类似物本品系统共享了一新见解。

研习术研究结论：

Selexipag、macitentan 和复钾显着消退了灵长类动物 HAPH 建模，而 riociguat 的作用较弱。 区别理解的DNA直接参与代谢管控、激活和英文翻译。 某些核糖体受到 HAPH 和疗程的制约。 我们常用多分组研习方法比对了关键DNA Serpina1、Cryz 和 Cmc1。 这些发现可能有助于更好地了解间歇性所涉及的小分子系统，并可能共享一新疗程靶标。

文献典故：

Xu X, Li H, Wei Q, Li X, Shen Y, Guo G, Chen Y, He K, Liu C. Novel Targets in a High-Altitude Pulmonary Hypertension Rat Model Based on RNA-seq and Proteomics. Front Med (Lausanne). 2021 Nov 3;8:742436. doi: 10.3389/fmed.2021.742436. PMID: 34805208; PMCID: PMC8595261.